dib® 2×Taq Master Mix

■ 产品说明：
本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq Master Mix专为常规PCR扩增反应优化，扩增长度可达8kb，能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应，大大地简化了操作过程，减少了PCR操作过程中的污染。2 × Taq Master Mix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择。经测试，染料的加入不影响PCR反应，在PCR反应完成后可直接电泳，节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出"A"碱基，可直接克隆于T载体中。
■ 产品特点：
高效：以λDNA为模板，扩增长度可达8kb，能高效扩增≤4kb片段
灵敏：可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
稳定：反复冻融几十次，4℃放置30天，室温放置一周后，扩增性能不受影响。
快捷：PCR反应所必需试剂全集于一管之中，数分钟即可完成反应体系配制。
便利：PCR反应后可直接电泳（含染料形式）。
■ 产品用途：
    1）常规PCR鉴定；
    2）小片段目标基因克隆；
    3）平端PCR产物加A。
■ 保存：
-20 ℃,保质期2年
■ 产品包装（A包装）：

产品组成体积

2×Taq Master Mix 1ml×5
PCR Mix 50μl

*PE012-02系列含上样染

■ 质量保证：
经检测无外源核酸酶残留，qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

■ 操作方法：
常用反应体系（50μl）：

2 × Taq Master Mix*	25μl
上游引物	0.2-1.0μM（终浓度）
下游引物	0.2-1.0μM（终浓度）
模板 Taq	1-50ng（质粒）
模板 Taq	10ng-1μg（基因组） 0.25μl（1.25U）
ddH2O	至50μl

*Mg2+终浓度为2mM
常用PCR循环：
当扩增片段＜3K；

94℃，	1分钟30秒
	94℃，20秒
30次循环：	50～60℃，20秒
	72℃，1kb/60秒
72℃	5分钟
4℃	保温

当扩增片段≥3K（推荐引物长度≥30bp）；

94℃，	5分钟
30次循环：	94℃，5秒
30次循环：	68℃，1kb/60秒
72℃	5分钟
4℃	保温

注意事项
  1）需要溶解完全后使用，防止离子浓度不均匀。
  2）菌液PCR时预变性时间≥5min，更有利于破壁。
  3）应根据实验目的选择合适的循环数，循环数过少，会造成扩增量不足；循环数过多，扩增量增加，但突变率也会增加，并造成非特异性扩增。
  4）根据引物Tm值设置合适退火温度，退火温度过低，会造成非特性扩增；过高可能扩增不到。